NY_T 2838-2015 禽沙门氏菌病诊断技术

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ICS 11.220,B41 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 2838—2015,禽沙门氏菌病诊断技术,Diagnostic techniques of avian salmonellosis,201570-09 发布2015-12-01 实施,中华人民共和国农业部发布,NY/T 2838—2015,刖 R,本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草,本标准由中华人民共和国农业部提出,本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC 181)归ロ,本标准起草单位:扬州大学、中国动物卫生与流行病学中心,本标准主要起草人:陈素娟、魏荣、彭大新、杨林、陈继明,I,NY/T 2838—2015,禽沙门氏菌病诊断技术,1范围,本标准规定了禽沙门氏菌病诊断技术操作规范,本标准适用于禽沙门氏菌病的诊断和禽沙门氏菌携带者判定,2规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本文件,GB 4789. 4—2010食品微生物学检验沙门氏菌检验,GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法,SN/T 1222—2012禽伤寒和鸡白痢检疫技术规范,世界动物卫生组织(OIE)陆生动物诊断试验和疫苗标准手册(第七版,2012),3缩略语,下列缩略语适用于本文件,DMSO:dimethyl sulfoxide,二甲基亚碉,DNA:deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸,dNTP : deoxynucleoside triphosphate,三磷酸脱氧核昔酸,PCR:polymerase chain reaction,聚合酶链式反应,SPF:specific pathogen free,无特定病原,TBE:trihydroxymethyl aminomethane-borecic acid-ethylene diaminetetra acetic acid,三羟甲基氨,基甲烷ー硼酸ー乙二胺四乙酸,EB:ethidium bromide,澳化乙锭,4培养基和试剂,本方法实验操作中所用各类培养基以及试剂如下:,a)除另有规定,本方法实验用水应按照GB/T 6682中规定的二级水,所用化学试剂均为分析纯,b)亮绿ー胱氨酸ー亚硒酸氢钠增菌液、普通营养琼脂、鲜血琼脂、麦康凯琼脂、沙门一志贺菌属,(SS)琼脂、去氧胆酸盐枸椽酸盐琼脂、伊红美蓝琼脂和亮绿中性红琼脂的配制,参见附录A,c)缓冲蛋白陈水(BPW)、四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液、亚硫酸铀,(BS)琼脂、Hektoen Enteric(HE)琼脂、木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂、三糖铁(TSI)琼脂、,蛋白陈水及靛基质试剂、尿素琼脂(pH 7. 2)、氟化钾(KCN)培养基、赖氨酸脱竣酶试验培养,基、糖发酵管、邻硝基酚B-D-半乳糖昔(ONPG)培养基、半固体琼脂和丙二酸钠培养基的配,制,见 GB 4789. 4—2010 附录 A,d)沙门氏菌〇和H诊断血清,e)生化鉴定试剂盒,f) Taq DNA聚合酶,g)电泳缓冲液(TBE),h) DNA分子量标准品,1,NY/T 2838—2015,〇 PCR弓I物,j)鸡白痢/鸡伤寒多价染色抗原和凝集抗原:见附录B,k)阳性血清:用标准株和变异株鸡白痢沙门氏菌制成的灭活抗原分别接种SPF鸡,采血,分离制,得血清,1)阴性血清:SPF鸡采血,分离制得血清,m)生理盐水,5设备和器材,本方法实验操作中所用各种设备以及器材如下:,a) 37℃培养箱;玻璃研磨器或组织匀浆机;台式高速离心机;生物安全柜或者超净工作台;振荡混,匀器;PCR扩增仪;电泳仪;电泳槽;紫外凝胶成像系统;水浴锅;2℃.4℃冰箱;一20℃冰箱,b)酒精灯;玻璃板或白瓷板;剪刀;银子;灭菌试管;试管架;滴管;一次性注射器等。可调微量移,液器ー套:。.5 mL-1O *L、20 mL~200 mL,1OO mL~1 000 ML,12 道可调微量移液器 10 “」.,100レL及与移液器配套的滴头。L 5 mL PE管;0. 2 mL PCR管;96孔U型微量反应板,c)工作服;一次性手套;ロ罩;帽子等,6临床诊断,6. 1总则,当禽出现6. 2至6. 4中部分或全部情形时,作为初步诊断的依据之一,6.2流行病学,不同种类、不同日龄的家禽均可感染沙门氏菌,鸡白痢多见于雏鸡,禽伤寒多见于青年鸡或成年鸡,病禽和带菌禽是本病主要传染源。病原随粪便排出,污染水源和饲料等,经消化道感染。本病还可通过,呼吸道感染,也可经蛋垂直传播。鼠类可传播本病。本病发生无季节性,但多雨潮湿季节多发。一般呈,散发性或地方流行性,应激因素可促进本病的发生,6. 3临床症状,6. 3. 1鸡白痢,6.3. 1. 1 雏鸡,垂直传播的雏鸡出雏后品质差、发病迅速,1周内为死亡高峰;出壳后感染的雏鸡,2周龄.3周龄,为死亡高峰,死亡率可高达100%。最急性者,无临诊症状迅速死亡。稍缓者,精神不振,嗜睡,开始采,食减少或废绝,嗦囊空虚,两翼下垂,绒毛松乱,腹泻,粪便呈石灰样,封肛,发出尖锐叫声,最后因呼吸困,难及心力衰竭而死。引起关节炎时,胫跑关节肿胀,跛行。引起全眼球炎时,角膜混浊呈云雾状,失明,耐过鸡生长发育不良,成为慢性病例或带菌者,6.3. 1.2成年鸡,一般无临诊症状,产蛋量与受精率有所下降。极少数病鸡下痢,产蛋下降甚至停止。有的病鸡因卵,黄囊炎引起腹膜炎,腹膜增生出现“垂腹”现象,6.3.2禽伤寒,雏鸡和雏鸭发……

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